本试剂盒专为科学研究设计，严禁用于医学诊断。人表皮生长因子（EGF）Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测原理。在预先包被了adropin（AD）抗体的微孔中，依次加入样品、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，添加底物TMB进行显色反应。当TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再在酸性环境中转化为最终的黄色。反应颜色的深浅与样本中adropin（AD）的含量呈正相关关系。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下：

1. 血清：选用不含热原和内毒素的试管，避免任何细胞刺激，收集血液后以3000转离心10分钟，迅速小心分离血清和红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转离心30分钟后取上清液。

3. 细胞上清液：以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水捣碎，再进行3000转离心10分钟，以获取上清。

5. 保存：如样本未及时检测，请分装成一次用量并冻存于-20℃，避免反复冻融，解冻时在室温下进行，确保样本均匀充分解冻。

在操作过程中需特别注意以下事项：试剂盒中标准品（S0-S5）浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备：将20×洗涤缓冲液以1:20的比例用蒸馏水稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断：在Excel中绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制线性回归曲线，并根据曲线公式计算各样本的浓度值。

尊龙凯时人生就博提醒用户，本试剂盒的所有性能与使用方法均需遵循说明，以确保实验结果的准确性与可靠性。