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荷兰阿姆斯特丹大学利用尊龙凯时人生就博的纳米流式细胞术对血浆细胞外囊泡进行标准化测量

发布时间:2025-02-21   信息来源:郎羽桂

“细胞外囊泡”(EVs)是细胞自然释放的细胞衍生颗粒与磷脂双分子层的结合体。EVs广泛存在于多种体液中,如血液和尿液。EVs的特性,包括细胞起源、浓度、组成以及功能,通常与特定疾病密切相关。因此,研究者们正在积极探索EVs是否可以作为癌症和心血管疾病等疾病的生物标志物。然而,要将EVs有效应用于生物标志物的研究,必须具备可靠且可重复的测量方法。目前,EVs作为生物标志物研究的主要瓶颈在于不同仪器及单位之间测量结果的不一致性,这对于多中心研究的建立形成了障碍。多中心研究是临床生物标志物研究的先决条件。

荷兰阿姆斯特丹大学利用尊龙凯时人生就博的纳米流式细胞术对血浆细胞外囊泡进行标准化测量

为了提升数据的可比性,本文进行了一项研究,开发了具有类似EVs物理性质的新参考材料和程序。这些新参考材料和程序的验证依赖于生物测试样品的支持。为此,我们开发了一种人血浆EVs测试样品(PEVTES),其特点是:i) 与血浆中的亚细胞颗粒相似,ii) 易于获取,iii) 兼容流式细胞仪,iv) 具备良好稳定性。

本研究方法采用三例空腹供体血浆制备PEVTES。使用血小板特异性(CD61)和红细胞特异性(CD235a)抗原或乳黏附素抗体对EVs进行免疫荧光染色。为了降低可溶性蛋白、脂蛋白及未结合试剂的浓度,我们通过大小排斥层析法从血浆中分离出染色的EVs。分离后,进一步过滤PEVTES以去除残余血小板。PEVTES随后使用冷冻保存剂、二甲亚砜(DMSO)、甘油或海藻糖稀释,并在-80℃下保存12个月。解冻后,使用校准的纳米流式细胞仪(ApogeeA60-Micro)测量染色的EV浓度。为了评估PEVTES的稳定性,我们在冷冻前以及于-80℃保存1、3、6和12个月后使用流式细胞仪测量染色的EVs浓度,并对其流速、荧光信号和光散射信号进行校准。

PEVTES在保存期间的稳定性测试表明,PEVTES具备良好的性能,具体特性包括:1) 类似于血浆中的亚细胞颗粒,2) 使用便捷,3) 与纳米流式细胞术兼容,4) 具备良好的稳定性。因此,开发的PEVTES成为验证新开发的参考物质和程序的理想候选对象。

在EVs的检测领域,尊龙凯时人生就博凭借其出色的分析仪器,提供了一系列优化设计,专注于外泌体微囊泡(EVs)等小颗粒的分析。这些设备因其卓越的灵敏度、稳定性和可靠性,广泛应用于高质量的生物医学研究。

尊龙凯时人生就博的技术不仅适用于纳米级别的颗粒分析,还可有效用于常规动物细胞检测,展现了其全方位的强大功能。我们期待通过持续的技术创新,为EVs的基础研究及转化应用提供坚实支持。